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紫外分光光度測定碳酸氫鹽透析液的醋酸含量

人工透析液一般用于腎功能衰竭或中毒患者體外血液透析用，是一類含有多種離子物質(zhì)的溶液，具有一定的滲透壓，通過人工腎透析膜裝置起著排除體內(nèi)代謝物、體內(nèi)毒素或過量藥物及調(diào)節(jié)體液的水-電解質(zhì)平衡等作用。

根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的中華人民共和國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《血液透析及相關(guān)治療用濃縮物》YY0598附錄A中的要求，透析液中的醋酸鈉（醋酸根）含量的測定采用液相色譜法，即選用陰離子排阻WESCAN#269-006色譜柱，用0.015mol/L的硫酸水溶液做流動(dòng)相，檢測波長220nm，外標(biāo)法測定量。也有資料介紹采用離子交換法測定，但此法操作費(fèi)時(shí)繁瑣。購買液相色譜需增加資金投入，因此我們嘗試采用公司現(xiàn)有的儀器紫外分光光度計(jì)UV1901PC對透析液中的醋酸根含量進(jìn)行檢測。

   我們查閱了大量的資料以尋找這方面的相關(guān)報(bào)導(dǎo)。我們參照資料介紹的方法制定了試驗(yàn)方案，并進(jìn)行了一系列的探索試驗(yàn)，得到了較為滿意的結(jié)果。

1試驗(yàn)

試驗(yàn)儀器

UV1901PC雙光束紫外可見分光光度計(jì)、分析天平、容量瓶、移液管等。

試驗(yàn)藥品

氯化鈉、氯化jia、氯化鈣、碳酸氫鈉、冰醋酸等符合《中華人民共和國藥典》2005版二部相關(guān)要求；氯化鎂符合國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-1001-（HD-0476）-2002有關(guān)規(guī)定；醋酸鈉合國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-1001-（HD-0584）-2002有關(guān)規(guī)定。

1.3 選取測定波長試驗(yàn)

1.3.1醋酸特征波長試驗(yàn)：用移液管量取適量的醋酸溶液加蒸餾水配制成3.8mol/L醋酸水溶液，以蒸餾水做空白，在190-900nm下掃描，沒有大吸收峰。

1.3.2 醋酸鈉特征波長試驗(yàn)：稱取一定量的醋酸鈉，用蒸餾水配置成6g/L的水溶液，以蒸餾水做空白，在190-1100Nm之間掃描，發(fā)現(xiàn)在220nm處有一大吸收峰。

干擾因素的觀察：將上述藥品按表2透析液組分的配方制成透析液，不加醋酸和碳酸氫鈉，以蒸餾水做空白，在190-1100nm波長范圍內(nèi)掃描，在197nm處有一大吸收峰，在220nm處吸收值很小。

檢測波長的確定：從上述2.3.1,2.3.2,2.3.3試驗(yàn)可知，選取220nm測定波長適合。這是因?yàn)椋?/span>1醋酸在190-1100Nm沒有大吸收峰，無法直接測定；2、在透析液中有碳酸氫鈉存在，能與醋酸起化學(xué)反應(yīng)生成醋酸鈉，所以只要測定醋酸鈉的含量就可這算成醋酸（根）含量；3、在220nm處透析液其它組分吸收值很小，對醋酸鈉含量的測定不產(chǎn)生干擾。

1.4 供試液的制備

1.4.1濃縮液的配制：為使配制的供試液均勻、重復(fù)性好且誤差小，我們將配方中含量較少的組分先制備成濃縮液，然后再按比例稀釋成透析液。

1.4.2 透析液制備：按透析液的配方，以配制1000ml透析液計(jì)算，各組分加入量。

1.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線供試液的制備：以表2配方為基礎(chǔ)，改變醋酸濃縮液的加入量，制成一系列醋酸濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.5標(biāo)準(zhǔn)曲線

將表3醋酸濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)液在220nm用UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)的比色槽以蒸餾水做空白分別測試各溶液的吸光度值，每個(gè)濃度平行測試3次。

1.5.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：以醋酸鈉濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度平均值為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5.2 線性回歸方程制作：將表4數(shù)據(jù)作線性回歸，得到回歸方程：

C=119.56A-2.39mmol/L 式中 C----醋酸鈉含量，mmol/L

A------吸光度值。

1.5.3 線性相關(guān)檢驗(yàn)：將線性回歸數(shù)據(jù)作線性回歸檢驗(yàn)，得到可決系數(shù)R2為1.003，相關(guān)系數(shù)等于1.0，由此可見，醋酸鈉含量與吸光度值*線性相關(guān)。

供試樣品的測試

取費(fèi)森尤斯碳酸氫鈉透析粉，按使用說明配制成透析液，在220nm波長處用UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)的比色槽以蒸餾水做空白直接測定溶液的吸光度，將吸光度數(shù)據(jù)代入回歸方程可計(jì)算出溶液中醋酸鈉的含量，或者從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接查得測試結(jié)果，以此計(jì)算出透析液中的醋酸含量。

1.6.1 費(fèi)森尤斯透析液的配制：產(chǎn)品分為A、B兩種干粉。按產(chǎn)品說明書要求的比例直接配制成1000ml透析液。

1.6.2 供試液醋酸鈉含量的測試：將表5制備的供試液在220nm波長處用UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)的比色槽以蒸餾水做空白直接測定溶液的吸光度，將吸光度值代入回歸方程計(jì)算出透析液中的醋酸鈉含量，然后折算出溶液中醋酸的含量。

結(jié)論及討論

2.1試驗(yàn)證明，用紫外可見分光光度計(jì)法替代液相色譜法測定透析液中的醋酸含量方法是可行的。因?yàn)橘M(fèi)森尤斯碳酸氫鈉透析液中醋酸含量的標(biāo)示值為2.5~4.5mol/l，并且國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的中華人民共和國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《血液透析及相關(guān)治療用濃縮物》網(wǎng)上征求意見稿中要求醋酸含量應(yīng)為標(biāo)示量的±10%，由結(jié)果可知，測定結(jié)果全部在標(biāo)示量范圍內(nèi)，且重復(fù)性良好。

紫外測定透析液中的醋酸含量試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作不能選擇不加醋酸的透析液作為空白溶液，必須用配制透析液的蒸餾水（或透析用水）做空白。從表4可以看出，未加入醋酸的透析液其吸光度測定結(jié)果偏離標(biāo)準(zhǔn)曲線，這是因?yàn)?，加入醋酸的透析液的溶液組成發(fā)生了改變，醋酸與溶液中一部分碳酸氫鈉發(fā)生了化學(xué)反應(yīng)生成了醋酸鈉，使溶液中碳酸氫鈉濃度江都，溶液特征發(fā)生變化，導(dǎo)致溶液吸光度產(chǎn)生偏離。因此，用配制透析液的蒸餾水或透析用水作空白是實(shí)驗(yàn)的正確選擇，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中能明顯看出這一點(diǎn)。